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为什么用原核表达系统表达真核生物的蛋白质时,克隆的真核基因不能来自基因组文库?真核基因应如何获得?

答案

参考答案:

对真核细胞来说,从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同,基因组DNA文库所含的是带有含子和外显子的基因组基因,而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA。因为原核细胞不具有mRNA转录后加工系统,不能进行剪接、去除内含子等操作,所以

用原核表达系统表达真核生物的蛋白质时,克隆的真核基因不能来自基因组文库,应从cDNA文库中获得,或者通过提取mRNA后RT-PCR方法获得。

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