问题
问答题 简答题
碱裂解法提取质粒DNA的原理,分析影响试验结果的各种可能因素。
答案
参考答案:
碱裂解法原理:在碱性条件下,双连DNA氢键断裂,结构破坏变性,环状超螺旋质粒不充分变性。在中性条件下变性质粒恢复原来构型,而线性大分子细菌DNA不能复性呈不溶物而经离心除去。
(各种可能因素是上一届的,具体其实大家可以根据那天师兄说的去写)
提取失败:
1)洗去双链时,将质粒DNA洗去;
2)破壁失败,质粒没析出;
3)加剂问题
电泳失败:1)电压太高
2)没加染色剂
3)胶穿孔
4)电泳时间过长