问题
问答题
酶纯化试验中，通常先用（NH4）2SO4作为分级沉淀剂，再用Sephade’Xg-25凝胶柱层析法从沉淀酶液中除去（NH4）2SO4。
请问
（1）与其他中性盐沉淀剂相比，用（NH4）2SO4做沉淀剂有何优点？
（2）如发现柱层析后酶的总活性较纯化前明显提高，可能的原因是什么？
（3）柱层析时，湿法装柱的注意事项主要有哪些？
答案
参考答案：（1）硫酸铵具有溶解度大、温度系数小、对酶活力影响小和有利于分离等优点。
（2）纯化前酶液中可能含有酶抑制剂。
（3）注意事项
①层析柱应与水平面垂直。
②柱床体积至少是上样体积的3倍以上。
③层析介质中不能出现气泡和断层。
④柱床表面要平整，并保有一定的水位。