答案：B

无脊椎动物与脊椎动物的主要区别是：①无脊椎动物的神经系统呈索状，位于消化管的腹面；而脊椎动物为管状，位于消化管的背面。②无脊椎动物的心脏位于消化管的背面；脊椎动物的位于消化管的腹面。③无脊椎动物无骨骼或仅有外骨骼，无真正的内骨骼和脊椎骨；脊椎动物有内骨骼和脊椎骨。故区别脊椎动物与无脊椎动物的主要特征是体内是否有脊椎骨。故本题选B。