2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：

(1)④过程应用的主要生物技术是_____________。

(2)杀虫基因(crylA)是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于____________工程技术范畴。

(3)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(图示部分基因及部分限制酶作用位点)，据图分析：

①．人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入_____________。

②．人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的________(基因)，保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于________。第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。

③若用限制酶Ⅱ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是_____________。

(4)若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为，则该酶识别的核苷酸序列是____________。

①成釉细胞后退，留出空隙，这些细长的空隙与基质接触；②釉原蛋白减少，晶体长大成熟，最后基本只留下非釉原蛋白作为基质；③成釉细胞顶端分泌釉原蛋白和非釉原蛋白；④釉柱在空隙中形成，长轴与空隙方向平行，组装有序化；⑤HA晶体开始形成，晶体被包在非釉原蛋白中，其外是连续性的釉原蛋白；⑥晶体长轴与釉质牙本质界线垂直延伸。釉质矿化的步骤是（）

A.③⑤⑥①④②

B.⑤③⑥①④②

C.④⑤③⑥①②

D.⑤①④②③⑥

E.③⑥①⑤④②