问题
问答题
简述用双波长光度法测定干扰严重两混合物的原理。
答案
参考答案:设有A、B两组分,其中A为待测组分,B为干扰组分,为了消除干扰组分的吸收。一般采用作图法以确定干扰组分的等吸收波长。规定测定波长为λ2;参比波长为λ1。应当遵循的原则是:使干扰组分在λ1处的吸光度等于它在λ2处的吸光度;使待测组分在λ1处的吸光度与它在λ2处的吸光度差值比较大。在选择波长时,一般以持测组分的最大吸收波长为测定波长λ2。
根据吸光度的加和原则,混合物在λ1和λ2处的吸光度分别为
Aλ1=Aλ1(A) +Aλ1(B)
Aλ2=Aλ2(A) +Aλ2(B)
双波长分光光度法的测量值为;
△A=Aλ2-Aλ1
也就是:△A=Aλ2 (A) +Aλ2(B)-(Aλ1(A)+Aλ1(B))
由于Aλ1(B)=Aλ2(B)
所以△A=Aλ2 (A) -Aλ1A)=(ελ2(A)-ελ1 (A) )*b*C
可见双波长分光光度法的测量信号与干扰组分无关,与待测组分浓度成正比。