问题
实验题
科学家通过探究DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性,从而抑制肿瘤细胞生长增殖以寻找一种抑制肿瘤细胞的新途径。
方法思路:
①构建干扰质粒____[插入针对人体端粒酶逆转录酶亚基(hTERT)的mRNA的干扰序列]和对照质粒PSG—CTR(插入不针对人体任何mRNA序列的对照组序列)。
②将空质粒PSG(不含目的基因)、干扰质粒PSG—AS和对照质粒分别感染肝癌细胞。
③一段时间后观察检测细胞的____。计算细胞凋亡率,绘制肝癌细胞生长曲线。结果如下图:
请回答:
(1)完成实验步骤中的空格:①.___________;②.___________。
(2)在构建质粒时,要将质粒导入大肠杆菌细胞并用_______培养基进行筛选鉴定,然后再提取。因此,在构建的表达载体质粒上必须含有__________。
(3)端粒酶可以通过以自身的_______为模板,_______为原料来合成端粒DNA。
(4)分析实验结果,得出实验结论:__________________________。
答案
(1)PSG—AS 端粒酶活性、细胞凋亡情况、细胞生长情况
(2)选择 标记基因
(3) RNA 4种脱氧核苷酸
(4)从结果可知PSG—AS导入肝癌细胞发挥作用后,端粒酶活性降低,细胞凋亡率升高,细胞生长受抑制,说明通过DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶活性的方式,能较好抑制肿瘤细胞